Romanın baş karakterleri George Milton ve Lennie Small, çiftliklerde iş aramakta olan iki işçidir. George, zeki ve iyi niyetli bir adamdır ama Lennie, zeka geriliği olan ve düşüncelerini ve isteklerini kontrol etmede güçlük çeken bir karakterdir. Roman boyunca bu ikili, zorlu yaşam koşullarında hayatta kalmak için mücadele ederken, diğer çiftlik çalışanlarına da dokunarak onların hikayelerini anlatır. Romanın önemli karakterlerinden biri de Curley'nin eşi olan adı belirtilmeyen genç kadındır. Kadın, toplumun kurallarına uymayan ve kendini ifade edemeyen bir karakterdir. Roman boyunca kadının hikayesi, erkek egemen bir toplumda kadınların yaşadığı güçsüzlüğü göstermektedir.
Roman, 1930'ların Amerika'sında yaşanan ekonomik kriz nedeniyle yoksulluk ve işsizlik sorunlarına da vurgu yapmaktadır. George ve Lennie'nin, zorlu yaşam koşullarındaki mücadelesi, işsizliğin zorluklarını ve yoksulluğun neden olduğu sorunları açıkça yansıtmaktadır. Roman aynı zamanda göçmenlik sorununa da değinir. Karakterlerden bazıları, çiftliklerde iş bulmak için diğer eyaletlerden gelmiştir ve bu insanlar, insanları ülkenin diğer bölgelerinden gelenlerle karşılaştıran bir metafor gibi kullanılmaktadır.
Sonuç olarak, John Steinbeck'in "Fareler ve İnsanlar" adlı eseri, insanların hayatta kalabilmek için verdikleri mücadeleleri anlatarak toplumsal sorunlara vurgu yapmaktadır. Eserde işlenen konular, ekonomik kriz, yoksulluk, işsizlik, göçmenlik ve toplumsal eşitsizlik gibi sorunlar, hala günümüzde de varlığını sürdürmekte olan konulardır ve Steinbeck'in bu romanı hala güncelliğini korumaktadır.